Microscopio óptico

Tal como su nombre lo indica, un microscopio óptico se basa en lentes para obtener el aumento de las imágenes. Otros nombres que recibe son: microscopio de luz y microscopio de campo claro.

El primer microscopio óptico fue creado por  Anton van Leeuwenhoek quien a través de una simple lente convexa depositada sobre una plancha de metal de reducido tamaño lograba examinar diversas muestras. También se conoce a este instrumento como microscopio simple.

Este tipo de microscopios se utilizan en laboratorios de histología y anatomía patológica.



microscopio optico
Microscopio óptico

El microscopio óptico fue el primer tipo de microscopio inventado y nació en el siglo XVII. Este es el tipo de microscopio más básico ya que su funcionamiento se basa en un conjunto de lentes y en el uso de luz visible. Con esto consigue obtener imágenes aumentadas de la muestra que se desea analizar.

El microscopio óptico es uno de los inventos que ha marcado un antes y un después en la historia de la ciencia, especialmente en el campo de la biología y la medicina. ¿Qué es un microscopio óptico? Esencialmente se puede definir como un instrumento que permite observar en un tamaño aumentado elementos que son imperceptibles a simple vista.

Partes del microscopio

Partes básicas de un microscopio óptico y explicación básica de su funcionamiento

Básicamente el microscopio óptico se puede dividir en tres sistemas: el sistema óptico, el sistema mecánico y el sistema de iluminación.

El sistema óptico se compone de un conjunto de lentes y elementos que su usan para regular la luz.

El sistema mecánico se encarga del soporte de la estructura y dotar de movimientos finos para lograr enfocar la imagen.

El sistema de iluminación es el encargado de proveer la fuente de luz que iluminará la muestra.

Sistema óptico

Objetivos

Los objetivos reciben la luz que enfoca la muestra y la atraviesa. La imagen que reciben es ampliada gracias al sistema de lentes que tienen.

Ocular

El ocular amplía la imagen que recibe del objetivo y es precisamente, a través de el por el cual se hace la observación.

Sistema mecánico

Base y brazo

Es la que permite que el telescopio se ubique de manera estable. Esta es una parte muy importante del equipo ya que es el que le brinda sustentabilidad. El brazo, conecta la base con el sistema óptico.

Platina

La platina es la pieza sobre la cual se coloca la muestra. Esta no está instalada de forma fija con el brazo sino que su posición es regulada por medio de los tornillos macro y micrométricos.

Revólver

El revólver es el lugar donde se encuentran los objetivos (generalmente lleva 3 o 4) y puede girarse para seleccionar cada uno.

Tubo

Es el encargado de conectar los objetivos con el ocular.

Sistema de iluminación

Fuente de luz

El sistema óptico se compone de una fuente de luz que emite rayos hacia la muestra. Esos rayos pasan por un condensador que tiene por función concentrar los rayos de luz sobre la preparación. Este condensador lleva acoplado un diafragma que sirve para regular la cantidad de luz que incide sobre la muestra.

Condensador

Es un conjunto de lentes que concentran los rayos de luz sobre la muestra.

Diafragma

Se encuentra dentro del condensador y tiene por función ajustar la apertura de este para variar la cantidad de luz que llega al objetivo.

Estos tres sistemas forman parte del microscopio óptico. Y todos son piezas fundamentales de este.


Cómo funciona el microscopio óptico

El principio fundamental del funcionamiento del microscopio óptico es la divergencia o convergencia de los rayos de luz. A través del uso de lentes es posible modificar la trayectoria de los rayos y así conseguir una imagen aumentada.

Los microscopios ópticos se valen de varias lentes para lograr aumentar el tamaño de la imagen. Algunas de estas lentes se encuentran en el objetivo mientras que otras en el ocular.

Las lentes del objetivo son las primeras que generan una imagen de mayor tamaño que luego es ampliada nuevamente a través de las lentes del ocular. Esa imagen la generan gracias a la luz que proviene del foco, que ayudado por un condensador y diafragma, enfoca la muestra.

Historia del microscopio óptico

Desde el siglo XIII se utilizaron lupas para observar imágenes en tamaño aumentado. Esas estaban compuestas por lentes que fueron muy bien estudiadas por Roger Bacon. Se puede afirmar que esos sencillos instrumentos fueron los antecesores de los actuales microscopios.

Debieron pasar tres siglos para que Zacharias Janssen, un fabricante holandés de lentes, construyese el primer microscopio compuesto. Ese primer microscopio, que vio la luz a finales del siglo XVI, consistía en dos lentes instaladas en un tubo que brindaban un aumento de 9x. Este fue un enorme avance para la época si se lo compara con los conocidos microscopios simples que no eran más que simples lupas.

Janssen no fue el único interesado en el desarrollo de instrumentos capaces de aumentar el tamaño de una muestra sino que también el mismísimo Galileo Galilei, hizo su aporte al fabricar un simple microscopio combinando una lente convexa y una cóncava. Con este aparato que denominó ochiollino logró un aumento de 30x lo cual fue un enorme avance para esa época.

El término microscopio fue utilizado por primera vez por Giovanni Faber en el año 1625. Y ya a partir de entonces, comienzan a aparecer los primeros textos científicos en el que se documentan observaciones realizados con microscopios. El primero de estos textos fue escrito en 1665 por Robert Hooke y se llamó Micrographia. En este libro se pueden ver ilustraciones de insectos y plantas realizadas con microscopios.

Durante esta época, Antonie Van Leeuwenhoek mejoró aún más la calidad de los microscopios (aunque era un microscopio óptico simple (un microscopio de una sola lente) de la época. Con estos avances pudo descubrir los glóbulos rojos de la sangre y observar bacterias.

A partir de entonces, el microscopio se fue perfeccionando. Ya en el siglo XIX, nace la conocida empresa de Carl Zeiss que se dedica a la fabricación de microscopios. Es precisamente esta firma la que moderniza el aparato aplicando las teorías de óptica que fueron desarrolladas por Erns Abbe. Los microscopios Zeiss contínuan siendo hoy en día, los mejores equipos del mercado.

Ya en el siglo XX, se desarrollaron nuevas técnicas de microscopía y se crearon nuevos tipos de microscopios. De todos estos equipos el que mayor aumento logra es el conocido microscopio electrónico.

Tipos de microscopios ópticos

El microscopio óptico fue mejorado y perfeccionado en numerosas oportunidades. Producto de ello, nacieron diferentes tipos de microscopio:

Microscopio compuesto: este es el modelo más elemental de microscopio óptico. Se llama compuesto porque lleva dos o más lentes en su sistema óptico. Se lo conoce como compuesto para distinguirlo del microscopio simple que solo lleva una lente.

Microscopio monocular: son aquellos equipos que solo poseen un ocular y en consecuencia, solo sirven para mirar con un solo ojo. Estos microscopios no son los más recomendados para analizar muestras durante un largo período de tiempo porque resultan muy incómodos. Es por eso, que en ámbitos profesionales siempre se utilizan microscopios binoculares.

Microscopio binocular: estos equipos poseen dos oculares por lo que es posible observar la muestra con ambos ojos. Son microscopios muy cómodos para realizar largas observaciones. En estos equipos la imagen se divide entre los dos oculares a través de un prisma óptico.

Microscopio trinocular: estos equipos además de los dos oculares para observar la muestra tienen uno adicional para colocar una cámara y así grabar o tomar fotografías de las observaciones.

Microscopio invertido: en este tipo de microscopio la posición de la fuente de luz y el objetivo es la opuesta al microscopio convencional. La muestra es iluminada desde arriba y el objetivo se encuentra por debajo de la platina. Es muy útil para observar células vivas que se depositan en un recipiente donde se encuentran constantemente hidratados.

Microscopio estereoscópico: este es un tipo de microscopio binocular que lleva dos oculares pero la diferencia que tiene es que lo que se observa es en tres dimensiones. Para lograr este efecto, estos equipos llevan dos objetivos (uno por cada ocular). En los microscopios binoculares la imagen que se ve por cada ocular es exactamente la misma mientras que en el estereoscópico esta cambia. Ver partes del microscopio estereoscópico

Microscopio digital: son microscopio en donde en lugar de ocular se usa una cámara que permite realizar capturas de la muestra. Estos equipos se conectan en general con computadoras.

Microcopio USB: son variantes del microscopio digital que se destacan por su bajo coste. A pesar que los aumentos conseguidos no son muy altos sí son muy útiles en ciertos ámbitos como los trabajos de electrónica.

Modos de uso del microscopio óptico

Cuando se hace uso de un microscopio óptico lo más habitual es teñir la muestra para lograr que contraste con el fondo brillante. En caso que la muestra no sea teñida, el contraste puede ser demasiado bajo y en consecuencia se pierden muchos detalles. Además de la tinción hay microscopios especialmente diseñados para lograr buenos contrastes mediante la modificación del haz de luz.

Tipos de microscopios
Microscopio de campo oscuro
Microscopio de luz polarizada (petrográfico)
Microscopio de contraste de fases
Microscopio de contraste por interferencia diferencial
Microscopio de luz infrarroja
Microscopio de luz ultravioleta
Microscopio de fluorescencia

Un capítulo aparte merecen los microscopios electrónicos. Estos en lugar de utilizar haz de luz usan haz de electrones. La muestra se deposita en una cámara de vació donde se hace un barrido completo de la muestra. Esos electrones se reflejan en una pantalla donde se hace una reconstrucción de la imagen de la muestra.

Los dos tipos de microscopio electrónico más usados son el microscopio electrónico de transmisión y el microscopio electrónico de barrido.

Clases de microscopios

Son muchos los tipos de microscopios como así también la forma de clasificarlos. Aquí te dejamos un compendio de clasificaciones.

Microscopios según el número de lentes

Se diferencias los microscopios de acuerdo a la cantidad de lentes que llevan en su sistema óptico.





Microscopio simple

Son microscopios que solo llevan una sola lente y en general, se los conoce como lupa. Durante el siglo XVII, Antonie van Leeuwenhoek alcanzó los 200x de aumento con estos instrumentos simples y durante su época, fue el aparato que mayor aumento brindaba.

Microscopio compuesto

Este tipo de microscopio se compone de más de dos lentes. Estos son los sistemas habituales de todos los microscopios modernos. Los buenos equipos llevan varias lentes tanto en el ocular como en los objetivos para corregir las aberraciones ópticas (aberración cromática y aberración esférica) y lograr imágenes de gran calidad. El primer microscopio compuesto fue fabricado en el año 1590 por Zacharias Janssen.





Microscopios según el número de oculares

La cantidad de oculares es otro de los criterios ampliamente utilizados para clasificar los microscopios.

Microscopio monocular

Este tipo de microscopio solo posee un solo ocular para observar la muestra. Son equipos muy sencillos y más económicos lo que lo hace ideal para personas que se inician en este campo o tienen por hobby, la microscopía. Sin embargo, el hecho de ser monocular resulta incómodo cuando se utiliza durante largo tiempo. Hay personas que llegan a tener jaquecas por el uso prolongado de estos aparatos.

Microscopio binocular

Los microscopios binoculares poseen dos oculares. Las observaciones pueden hacer mirando con ambos ojos. Esto da una mayor comodidad y es el tipo de microscopios que más se ve en ámbitos profesionales. La distancia entre oculares es regulable para poder adaptarse fácilmente a cada usuario. Muchos confunden el microscopio estereoscópico con el binocular pero hay que decir que no todo microscopio binocular es estereoscópico.

Microscopio trinocular

Este es un tipo de microscopio que lleva dos oculares para observar y un tercero para utilizar con una cámara. Hoy en día, se utilizan cámaras que se conectan a computadoras para poder ver las imágenes en tiempo real. Son equipos muy usados en investigaciones y cuando se imparten clases. Es posible observar la muestra y al mismo tiempo hacer vídeos o fotografías.

Microscopios según fuente de iluminación

Muchos creen que la única fuente de iluminación de un microscopio es la luz visible sin embargo, hay muchísimas otras variantes.

Microscopio óptico

En el microscopio óptico la muestra se ilumina con luz visible. Esto implica que hay un foco de luz que apunta de forma directa a la muestra. La luz atraviesa el objetivo y el ocular hasta llegar al ojo de quien observa. Es el tipo de microscopio más habitual que se puede hallar pero tiene la desventaja que su poder de resolución está limitada por la difracción de la luz. El aumento máximo de este tipo de microscopio es de 1500x.

Microscopio electrónico

En el microscopio electrónico no se utiliza haz de luz sino que se usa un haz de electrones. La muestra se introduce dentro de un cámara de vació y allí, se le emiten electrones que luego de impactar contra ella, se dispersan e impactan contra una cámara sensible a esos electrones. Así se van recogiendo los electrones dispersados y se reconstruye la imagen.

Estos microscopios logran un aumento muy superior al resto. Como contra, tiene que no es posible examinar muestras biológicas vivas.

Los dos tipos de microscopios electrónicos más importantes son el microscopio electrónico de barrido y el microscopio electrónico de transmisión.

Microscopio de luz ultravioleta

Estos microscopios utilizan como fuente de luz, rayos ultravioletas. Este tipo de luz tiene una longitud de onda menor que la luz visible que se usa en los microscopios ópticos. Con estos equipos no solo se logra una mejor resolución sino que también es posible observar muestras que con microscopios de luz visible aparecen como transparentes.

Microscopio de luz polarizada - petrográfico

Es un tipo de microscopio óptico que se usa para observar estructuras cristalinas en minerales y rocas. De ahí, que se lo conozca como microscopio petrográfico.

Estos equipos llevan dos polarizadores que hace la muestra se ilumina con luz de una dirección de oscilación específica.

Microscopio de fluorescencia

Estos microscopios usan principios de la fluorescencia para generar las imágenes. Son microscopios que permiten realizar observaciones de sustancias que emiten luz cuando se iluminan bajo una longitud de onda específica. Las muestras se iluminan con una lámpara de xenón o una lámpara de vapor de mercurio. Además llevan filtros de luz para aislar la luz que corresponde a la muestra.

Microscopios según la forma de la luz

Básicamente existen dos tipos de microscopios ópticos en función de la trayectoria de la luz hasta llegar al objetivo.

Microscopio de luz transmitida

En este tipo de microscopio la luz se encuentra debajo de la muestra. La ilumina desde abajo y la atraviesa. Para realizar las observaciones es necesario que la muestra se encuentre cortada en láminas finas. Este sistema de iluminación es el más usado en los microscopios ópticos.

Microscopio de luz reflejada

La muestra se ilumina de forma indirecta y desde arriba y parte de esa luz se desvía hacia el objetivo. Estos equipos son útiles para observar materiales opacos como cerámicas, metales, etc. Hay microscopios ópticos que vienen equipados con ambos sistemas de iluminación de forma tal que se pueden observar muestras semitransparentes y opacas.

Los microscopios estereoscópicos siempre se iluminan con luz reflejada.

Otros tipos de microscopios

Microscopio vertical

En los microscopios verticales el foco de luz se encuentra en la base de la estructura. Luego se halla la platina, los objetivos y el ocular. Esta es la forma en la que encontramos los microscopios de forma más habitual.

Microscopio Invertido

En los microscopios invertidos la muestra se ilumina de la parte superior y el objetivo y los oculares se ubican debajo de la platina. Son microscopios útiles para observar muestras vivas ya que se ilumina un recipiente desde arriba y desde el fondo se las observa.

Microscopios digitales

Los microscopios digitales son equipos que no llevan oculares sino simplemente una cámara. Por lo general, la cámara se conecta a una computadora pero también hay otros que llevan una pantalla incorporada. En estos últimos, se puede ver la muestra en la pantalla y guardar las imágenes en tarjetas SD.

Microscopio USB

Estos son microscopios digitales que tienen solo una lente de aumento y una cámara digital. El aumento que alcanzan es muy limitado si se lo compara con los microscopios convencionales. Estos equipos son muy utilizados para trabajos en electrónica donde hay que observar los pequeños componentes de las plaquetas.

Microscopio estereoscópico

Son microscopios que permiten realizar observaciones en tres dimensiones de las muestras. Estos siempre llevan dos oculares (son microscopios binoculares) pero la imagen que recibe cada ocular es un poco distinta uno de otro ya que cuentan con un objetivo especial para cada uno.

El aumento que consiguen es inferior al óptico pero son muy útiles cuando la muestra debe ser manipulada.

Microscopio confocal

El microscopio confocal, fue inventado pro Marvin Minsky en 1957, es un tipo de microscopio de fluorescencia que en lugar de iluminar toda la muestra de manera general se ilumina punto por punto. Así se reconstruye la imagen al final de todo el proceso. Es como un escaneado de la muestra el cual es muy similar a los microscopios electrónicos de barrido.

Microscopio de campo oscuro

En estos equipos la muestra se ilumina de forma oblicua de forma tal que los rayos de luz fueron dispersados por la muestra. Es una técnica que permite observar muestras que de otro modo sería imposible debido a su transparencia. Esto tiene la ventaja que no es preciso teñir la muestra para aumentar el contraste y observarla.

Microscopio de contraste de fases

Este microscopio fue inventado por Frits Zernike en 1932. Se basa en modificar la velocidad con la que la luz atraviesa una muestra (la luz viaja a distintas velocidades de acuerdo al medio). Ese efecto se amplifica para generar las imágenes. Con este microscopio no es necesario teñir las muestras. Es un microscopio apto para observar células vivas.


Clasificación de tipos de microscopios - la más simple

Microscopio compuesto u óptico: logra obtener imágenes ampliadas gracias al sistema de lentes que posee. Estos microscopios no obtienen aumentos muy altos. Pueden ser monoculares o binoculares.

Microscopio estereoscópico: a través de estos se pueden observar objetos en tres dimensiones. Son ideales para observaciones que no requieren de grandes aumentos.

Microscopio de campo obscuro: a través de estos los objetos se ven como puntos luminosos sobre un fondo obscuro.

Microscopio de fluorescencia: son ideales para estudiar determinados preparados a los que se les puede adicionar flurocromos.

Microscopio de contraste de fases: modifica la trayectoria de los rayos de luz para obtener contrastes.



Microscopio de campo obscuro

Microscopio de contraste de fases

Microscopio de contraste

Microscopio estereoscópico

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