Luego de haber enumerado los conceptos básicos sobre métodos de tinción es importante hacer una descripción de los colorantes utilizados.
La gran mayoría de los colorantes utilizados son compuestos orgánicos que tiene una afinidad determinada por los elementos celulares.
Tipos de colorantes
Algunos colorantes son cationes (moléculas con carga positiva) que se combinan con moléculas de caga negativa (por ejemplo, con las que están presentes en los ácidos nucleicos). Ejemplo de estos colorantes son el azul de metileno, la safranina y el cristal violeta.
También existen colorantes compuestos de aniones (moléculas de carga negativa) que se combinan fácilmente con cationes (ejemplo: proteínas). Ejemplo: eosina, rojo Congo y fucsina ácida.
Dentro de otro grupo se encuentran los colorantes liposolubles que se combinan con materiales lipídicos. El negro Sudán es un ejemplo de este tipo de colorante.
Tipos de tinción
Tinción directa: se produce cuando el colorante tiñe la muestra sin que sea necesario ningún procedimiento previo.
Tinción indirecta: cuando el colorante precisa que la muestra sea tratada previamente con otra sustancia química (llamada mordiente). Un mordiente muy común es el ácido tánico.
Colorantes usados en microscopía
Azul brillante de Coomassie
Es un colorante que tiñe proteínas de un color azul fuerte. Es muy usado para teñir las corridas de proteínas cuando se realiza electroforesis en gel.
Azul de metileno
Se usa para teñir células animales y hacer más visibles sus núcleos. Se usa mucho para teñir los extendidos de sangre.
Azul Nilo
Se usa para teñir núcleos en color azul. Es un colorante que sirve para teñir células vivas.
Bismarck Brown
Brinda un color amarillo a mucinas ácidas. Es útil para teñir células vivas.
Bromuro de etidio
Este colorante se intercala en el ADN y se tiñe de un color naranja casi fluorescente.
Carmín
Es un colorante que brinda un color rojo fuerte y puede usar para teñir glicógeno. Para usar este colorante es preciso el uso de un mordiente como aluminio o alumbre.
Cristal violeta
Tiñe las paredes de las células de un color púrpura. Este es un color importante en la coloración de Gram.
DAPI
Este es un colorante nuclear fosforescente que produce una fuerte fluorescencia cuando es irradiado con luz ultravioleta. Es útil tanto para células vivas como fijadas.
Eosina
La eosina tiñe de un color rosado el citoplasma, la membrana celular y algunas estructuras extracelulares. Los eritrocitos los tiñe de un color rojo intenso.
Fucsina ácida
Se usa para teñir músculo listo, mitocondrias y colágeno.
Hematoxilina
Es un colorante nuclear y precisa de un mordiente para ser utilizado. El color que brinda es un color azul violeta o negro.
Hoechst
Se usa en la microscopía de fluorescencia para teñir ADN. El color que brinda es amarillento.
Lugol
Se usa para colorear células y marcar más el núcleo. Se tiñe de un color amarronado.
Plata
Se usa para teñir proteínas y ADN.
Rodamina
Se usa en la microscopía de fluorescencia para teñir proteínas.
Safranina
Es muy utilizada para contracoloración. Tiñe de un color rojo los núcleos celulares.
Tetróxido de osmio
Se utiliza para teñir lípidos y les otorga un color negro o marrón.
Verde de metilo
Se usa para teñir cromatina de células. Su uso es muy habitual en la microscopía de campo claro.
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